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品牌 |
Annoron-安诺伦 | 货号 |
AS050147-AS050148 | |||||||||||||||
产品分类 |
PCR系列 | 研究领域 |
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PNGase F (with His-tag) REF: AS050147-AS050148 储运条件 -20℃
产品组成
产品简介 PNGase F（肽 N- 糖苷酶 F）来源于 Elizabethkingiamiricola， 是一种高效的酰胺水解酶，可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂 合和复杂的寡糖糖蛋白。 PNGase F 的切割位点为糖蛋白内侧 N- 乙 酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间的酰胺键，同时将酶解 后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。 本产品通过大肠杆菌重组表达， 带有 His 标签， 含有 50% 甘油， 常应用于抗体及其相关蛋白去糖基化。
酶活单位定义 1 个酶活力单位 (U) 指在 10 μl 反应体系中， 37℃下反应 1 h 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95% 碳水化合物所需要的酶量。
失活条件 75℃温育 10 min。
质量控制 蛋白纯度检测 使用 SDS-PAGE 凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于 95%。 糖苷酶与蛋白酶活性检测 无可检出的内切糖苷酶 F1、F2 或 F3 活性；无可检出的蛋白酶活性。
使用方法 1. 变性条件下去糖基化 ① 将 1~20 μg 糖蛋白， 1 μl 10× Denaturing Buffer 和 ddH2O （如 有必要）混合至总体积 10 μl； 注： 10 × Denaturing Buffer 在低温储存时可能出现白色沉淀， 使用前可先在 37℃下温育使其溶解。 ② 100℃反应 10 min 使糖蛋白变性后，冰上冷却，离心 10 s； ③ 加入 2 μl 10× PNGase F Buffer，2 μl 10% NP-40 ，补充 ddH2O 使总反应体积为 20 μl； ④ 加入 1~2 μl PNGase F，轻轻混匀， 37℃孵育 1~3 h。
2. 非变性条件下去糖基化 ① 将 1~20 μg 糖蛋白， 2 μl 10× PNGase F Buffer 和 ddH2O （如 有必要）混合至总体积 20 μl； ② 加入 2~5 μl PNGase F, 轻轻混匀； ③ 37℃ 孵育 4~24 h。
PNGase F 的去除 本产品带有 His 标签，反应后可选择与目标糖蛋白不同的标签， 通过亲和层析将 PNGase F 去除。 |
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数量 |
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| 选择 | 品牌 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 分类 | 研究领域 | 说明书 | 数量 | 目录价 | |
| 1 | Annoron-安诺伦 | AS050038 | Taq SYBR® Green qPCR Premix (Universal) | PCR系列 |
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￥0.00 | 订购 询价 | |||
| 2 | Annoron-安诺伦 | AS050125 | PBS | PCR系列 |
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￥0.00 | 订购 询价 | |||
| 3 | Annoron-安诺伦 | AS050100 | T4 DNA Ligase(Fast) | PCR系列 |
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￥0.00 | 订购 询价 |
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