全部产品分类
品牌 |
Annoron-安诺伦 | 货号 |
AS000031 | ||||||||||||||||
产品分类 |
转染试剂 | 研究领域 |
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图像 |
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产品介绍 转染级线性聚乙烯亚胺（MW40000）是一种基于聚乙烯亚胺的瞬时转染试剂产品，具有较高的转染效果。聚乙烯亚胺是一种具有高阳离子电荷的有机大分子聚合物，容易结合带负电荷的核酸分子，形成带正电荷的复合物。该复合物与细胞表面阴离子结合，通过内吞作用进入细胞。该转染试剂细胞毒性低，适用于多种细胞系，广泛应用于重组蛋白、AAV等的生产。 与MW25000的转染试剂相比，MW40000转染试剂溶解性好，可直接在水中溶解，无需调节酸碱性助溶；操作更简便，转染效果好。
基本信息
使用说明 1. 试剂配置 所需材料： 去离子水或以上生物级水、1 mol/L氢氧化钠（NaOH）、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。 储存液配置： ⑴ 将1 g转染级线性聚乙烯亚胺（MW40000）溶解于900 mL去离子水中，在磁力搅拌器上搅拌均匀至完全溶解； ⑵ 用1 mol/L氢氧化钠调整pH至6.9~7.1（如pH大于7.1，用盐酸将pH值调整至6.9~7.1）； ⑶ 将溶液转入量筒（或量杯）内，加水定容至1 L； ⑷ 用一次性0.2 µm过滤器真空过滤除菌，即得到1 mg/mL的储存液； ⑸ 可根据需要分装储存液，储存在4℃可保存1个月。 2. 转染操作流程 接种细胞：为了提高转染效率，建议在转染前一天接种细胞，以转染时细胞密度在70~80%为宜； 准备DNA-转染试剂复合物： ⑴ 将DNA、转染试剂和稀释剂先回复至室温； ⑵ 用适合的无血清培养基稀释适量DNA，充分混匀制成DNA稀释液； 注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM或无血清DMEM。 ⑶ 按照一定比例（每1 μg DNA需用1-5 μL转染试剂，建议自行摸索配比），将稀释后的转染试剂滴加至装有DNA溶液的试管（勿颠倒添加顺序），一边轻轻涡旋，充分混匀，制成转染试剂稀释液。室温静置10~25分钟孵育。 转染细胞： ⑴ 在无血清条件下转染时，去除细胞培养基，替换成无血清培养基； ⑵ 细胞中加入适量DNA-转染试剂复合物，轻轻混匀，转染6-8小时后，更换新鲜预热的完全培养基； ⑶ 在合适条件中培养，转染后24小时即可检测到转入基因的表达（可自行确定适合的检测时间）。
运输及储存条件 运输条件：室温运输 保存条件：粉末在室温或4℃保存，有效期2年。
常见问题与解决方案 注意事项 1. 由于DNA和转染试剂的用量比值是决定转染效率的重要因素，同时由于各实验室质粒的定量误差、质粒纯化程度不同以及细胞状态不同，造成不同细胞和实验室的最优实验条件的差异，为取得最高的转染效率，初次应用时，建议先进行优化。最优条件确定后，实验的结果将比较稳定。对大多数细胞，每1 μg DNA使用3 μL转染试剂能获得较高转染效率，也可尝试每1 μg DNA使用1.5~4 μL转染试剂进行优化。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。 3. 本产品仅作科研用途。 |
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说明书 |
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数量 |
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| 选择 | 品牌 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 分类 | 研究领域 | 说明书 | 数量 | 目录价 | |
| 1 | Annoron-安诺伦 | AS000030 | 转染级线性聚乙烯亚胺（MW25000） | 转染试剂 |
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