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在细胞生物学领域，泛素化（Ubiquitination）作为一种关键的蛋白质翻译后修饰，调控着DNA修复、信号传导、蛋白质降解等多种细胞过程。其机制涉及E1、E2、E3酶的级联反应，以及多种泛素链类型（如K48、K63链接），直接影响疾病研究和药物开发。Enzo Life Sciences推出的泛素化试剂盒（Ubiquitinylation Kit，货号：BML-UW9920-0001，规格：1Kit），专为体外泛素化实验设计，凭借其标准化组件和卓越性能，已成为全球科研人员的首选工具。本文将深入解析该产品的核心特点、独特优势及前沿应用案例，助您优化实验设计，提升研究效率。
产品特点：标准化组件与灵活实验设计
Enzo泛素化试剂盒提供了一套完整的体外泛素化反应体系，确保实验的高效性和可重复性。核心特点包括：
·全面组件覆盖：Kit包含E1泛素激活酶、E2泛素结合酶（如UbcH5b）、生物素化泛素（Biotinylated Ubiquitin）及反应缓冲液。这简化了实验准备，用户只需添加目标蛋白和E3酶即可启动反应，避免了组分不匹配的风险。证据显示，该Kit支持多种泛素链类型，如K48和K63链接泛素链，适用于不同研究方向。
·灵活反应体系：实验体积可自由缩放（如从标准30uL缩减至10uL），适配高通量筛选或小规模验证。反应条件优化（30°C或37°C孵育1-3小时）确保高效催化，同时缓冲液配方（含Tris-HCl、MgCl?、DTT和ATP）维持反应稳定性，减少背景噪音。
·易于检测与纯化：Kit兼容Western blot、质谱等下游分析。生物素化泛素便于使用链霉亲和素检测，而反应产物可直接用于泛素化蛋白的富集和鉴定，提升数据可靠性。
产品优势：为何选择Enzo 泛素化试剂盒？
该Kit的核心优势在于其高效性、广泛适用性和用户友好性，显著优于同类产品：
·高效催化与高特异性：Kit的E1/E2酶组合确保了泛素转移的高效率。研究显示，其能在短时间内完成泛素链组装（如3小时内生成清晰的多泛素化条带），且对E3酶底物识别精准，减少非特异性结合。这得益于Enzo对酶活性的严格质控，确保批次间一致性。
·广泛适用性：Kit已成功应用于多种模式生物，包括植物（如棉花、水稻）、哺乳动物细胞（如淋巴瘤细胞）和体外重组蛋白系统。其兼容性覆盖基础机制研究至疾病模型，无需额外优化。
·操作简便与成本效益：标准化流程（按制造商说明操作）缩短实验学习曲线，新手也能快速上手。同时，Kit的高效性减少试剂浪费，降低单次实验成本，特别适合预算有限的实验室。
应用案例：前沿研究中的成功实践
Enzo泛素化试剂盒已在多篇高影响力文献中发挥关键作用，以下是三个典型案例，展示其在不同领域的应用价值：
1.植物抗病机制研究：棉花防御Verticillium dahliae
·研究背景：棉花中的SINA泛素连接酶在抗真菌感染中起核心作用，但其泛素化机制不明。
·Kit应用：研究团队使用Enzo Kit（含生物素化泛素和E1/E2酶），在体外验证了MBP-SINA蛋白的泛素化活性。反应在30°C孵育3小时，Western blot检测到清晰的K63泛素链信号，证实SINA通过泛素化增强防御基因表达。
·成果：该研究发表于《Plant Physiology》，揭示了SINA作为抗病靶点的潜力，为作物育种提供新思路。Kit的高灵敏度确保了低丰度蛋白的可检测性。
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