1. 产品照片 (包括管壁的批次号、管底的二维码的清晰照片)
2. 请提供您的实验结果并描述出现的问题
注意:
undefined 请在结果图片中标注准确的蛋白marker位置和大小,并标注每个泳道的样品信息;
undefined 请附上内参蛋白的检测结果;
undefined 请用文字语言准确地描述实验中出现的问题。
目标蛋白出现了两至三条蛋白条带,且MDA-MB-231细胞中有表达psma蛋白,但pc3细胞应该低表达甚至不表达psma蛋白,却出现了假阳。
3. 产品储存 (温度和分装)
undefined 储存温度: -20摄氏度
undefined 是否进行分装及分装后每管的体积: 未进行分装
4. 检测的样品
undefined 样品种属信息(Human/Mouse/Rat etc.):Human
undefined 如果检测样品为细胞系,请提供细胞系名称:mda-mb-231细胞,pc3细胞
undefined 如果检测样品为组织,请提供组织名称:
undefined 是全细胞裂解液还是某一亚细胞组分裂解液:全细胞裂解液
5. 裂解液
undefined 上样的蛋白总量(μg/lane): 10-15μg
undefined 裂解缓冲液类型: RIPA裂解液
undefined 蛋白酶抑制剂:磷酸酶抑制剂混合物,蛋白酶抑制剂混合物
上样缓冲液成分:
undefined 煮样温度和时间:100摄氏度,10min
6. 电泳和转膜
电泳 :
undefined 使用变性胶(SDS-PAGE)还是native胶(native-PAGE):SDS-PAGE
undefined 分离胶浓度:8%
转膜:
undefined 转膜方法(湿转/半干转 etc.):湿法
undefined 转膜电流/电压和转膜时间:300mA,2h
undefined 是否用丽春红染色检查过转膜效率?若有,请提供实验图片:否
7. 封闭条件
undefined 封闭剂成分(脱脂牛奶/BSA etc.)和浓度:5%脱脂牛奶
undefined 封闭时间和温度:室温,2h
8. 一抗
undefined 一抗稀释比例:1:1000
undefined 抗体稀释液:TBST
undefined 孵育时间和温度:4摄氏度,10-12h
undefined 洗液成分(请注明Tween的含量):TBST, 每1LTBS(1X)加入500μl Tween20
undefined 洗膜具体步骤:每次10min,洗3次
9. 二抗
undefined 产品名称:Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)HRP
undefined 品牌与货号:南京翼飞雪生物科技有限公司 YFSA02
undefined 二抗稀释比例:1:5000
undefined 孵育时间和温度:室温,2h
undefined 洗液成分(请注明Tween的含量):TBST, 每1LTBS(1X)加入500μl Tween20
undefined 洗膜具体步骤:每次10min,洗3次
undefined 是否与其它一抗搭配使用没有问题? 如果是, 请提供相关实验结果:与其它一抗搭配使用没有问题
是
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