蛋白挂柱后洗脱不下来主要是因为蛋白和柱子结合能力太强或者洗脱条件太温和,我们可以从以下几方面考虑解决问题。
1、洗脱条件太温和:重新摸索洗脱条件,增加缓冲液中咪唑浓度或者适当降低缓冲液pH以确定最佳的洗脱条件或者更、换缓冲液的成分(换成tris-HCl缓冲液)。
2、蛋白在柱子中沉淀:适当降低上样量或蛋白浓度,用咪唑线性洗脱。使用添加剂或者改变NaCl的浓度,或者在变性的条件下洗脱(加4-8M的尿素或者4-6M的盐酸胍)。
3、非特异性的疏水或者其他作用:在洗脱液中加非离子的添加剂(例如0.2%的Triton X-100)或者增加NaCl的浓度。
4、蛋白和柱子接触时间过长:可以减少蛋白和柱子的接触时间。
序号 | 最新资讯 | 浏览次数 | 作者 | 发布时间 |
1 | 安诺伦生物全国授权代理Iduron品牌产品——多糖标准品 | 249 | 市场部 | 2023-01-10 |
2 | 安诺伦全国授权代理Enzyme Research Laboratories品牌产品 | 272 | 市场部 | 2022-12-28 |
3 | 安诺伦全国授权代理G-Biosciences品牌产品 | 627 | 市场部 | 2022-12-28 |
4 | 安诺伦代理ABP Biosciences品牌——专注于生产优质的生物荧光试剂产品。 | 492 | 市场部 | 2022-04-24 |
5 | 好消息!安诺伦与Santa Cruz达成合作协议,我方已获得授权! | 1146 | 市场部 | 2022-03-18 |
6 | 安诺伦代理Detroit R&D品牌——用于心血管疾病和癌症的研究,诊断和治疗 | 1242 | 市场部 | 2022-01-13 |